KCI등재
SCOPUS
체외배양중인 생쥐의 초기 배 발달에 대한 Medicult 및 Human Tubal Fluid 배양액과 난구세포 공배양의 효과 = Effect of Medicult and Human Tubal Fluid Culture Media and Cumulus Cell Coculture on Early Mouse Embryo Development in vitro
저자
권영숙(Young Sook Kwon) ; 박현정(Hyun Jeong Park) ; 이현수(Hyun Soo Lee) ; 이여일(Yu Il Lee)
발행기관
학술지명
Obstetrics & Gynecology Science(Obstetrics & Gynecology Science)
권호사항
발행연도
1999
작성언어
-주제어
KDC
500
등재정보
KCI등재,SCOPUS,ESCI
자료형태
학술저널
발행기관 URL
수록면
2549-2557(9쪽)
제공처
목적: 본 연구는 보조생식술시 사용되는 기존의 Ham's F-10 배양액을 새롭게 소개되고 있는 Medicult와 Human Tubal Fluid (HTF) 배양액으로 대치할 수 있는지와 난구세포를 공배양 함으로써 배 발달율을 향상시킬 수 있는지의 여부를 알아보고자 시행하였다. 재료 및 방법: 배양액으로는 Ham's F-10, Medicult, 그리고 HTF 배양액에 0.4% 소 혈청단백을 각각 첨가하여 사용하였다. 2세포기 배아는 제 1세대 잡종 F1 암컷 생쥐에 pregnant mare's serum gonadotropin (PMSG)와 human chorionic gonadotropin (hCG)으로 과배란 유도 후 합사가 확인된 F1 생쥐의 난관으로부터 얻었으며, 공배양을 위한 난구세포는 ICR계 암컷 생쥐에 PMSG와 hCG 로 과배란을 유도한 후 생쥐의 난관으로부터 얻었다. 2세포기 배아를 Ham's F-10, Medicult 및 HTF 배양액 하에서 각각의 배 발달율을 비교 관찰하였고, 세가지 배양액 하에서 난구세포가 들어있는 공배양군과 들어있지 않은 대조군으로 각각 나누어 24, 48, 72, 96시간 동안 배양하면서 배 발달율을 비교 조사하였다. 결과: 각 배양액의 비교를 위해 96시간까지 배양하였을 때 부화까지 진행된 배 발달율은 HTF (87.5%)와 Ham's F-10 (85%) 배양액에서 Medicult (70.5%) 보다 유의하게 높았다. 생쥐 2세포기 배아의 세가지 배양액에 대한 난구세포 공배양에 의한 배 발달 증진 효과는 Medicult에서 24시간 (대조군 88.5% 대 공배양군 98.5%)까지는 유의하게, Ham's F-10 (86.5% 대 95.5%)과 HTF (91.3% 대 96.9%)에서는 48시간까지 유의성은 없지만 상승되게 나타났으나, 그 이후 96시간까지는 세가지 배양액 모두에서 대조군과 공배양군 간에 유사한 배 발달율을 보였다. 그리고 세가지 배양액 중 HTF가 유의한 차이는 없지만 배양 기간 동안 전반적으로 가장 높은 경향의 배 발달 효과 및 공배양 부가에 의한 배 발달 증진 효과를 나타냈다. 결론: 세가지 배양액에서 2세포기 배아를 96시간까지 배양하였을때 HTF와 Ham's F-10 배양액에서 Medicult 보다 더 높은 배 발달율을 보였으며, 공배양에 의한 효과는 Medicult에서 만이 한시적으로 유의한 배 발달 증진을 보였다. 양질의 배양액인 경우는 공배양에 의한 효과가 크지 않을 수 있는 점을 감안하면 Ham's F-10 과 HTF가 Medicult 보다는 더 안정화된 배양액으로 추정되므로, Medicult 보다는 HTF가 기존의 Ham's F-10 배양액을 대치할 수 있을 것으로 고려될 수 있으나, 본 연구결과 만으로는 보조생식술시 Ham's F-10 배양액을 Medicult나 HTF 배양액으로 대치할 수 없을 것으로 사료된다.
더보기Objectives: This study was to evaluate whether Ham's F-10 used in assisted reproductive technology (ART) could be replaced with newly-introduced Medicult or Human Tubal Fluid (HTF) media, and the rate of embryo development could be enhanced by cumulus cell coculture. Methods: Ham's F-10, Medicult, and HTF media supplemented with 0.4% bovine serum albumin (BSA) were used. Two-cell embryos were obtained from oviducts of mated F1 hybrid female mice superovulated by pregnant mare serum gonadotropin (PMSG) and human chorionic gonadotropin (hCG). Cumulus cells for coculture were obtained from oviducts of ICR female mice superovulated by PMSG and hCG. Two-cell embryos were cultured in Ham's F-10, Medicult, and HTF media respectively to observe and compare the rate of embryo development. In addition, two-cell embryos were cultured in these three media for 24, 48, 72, 96 hrs with or without cumulus cell, and rates of embryo development were investigated and compared. Results: As for the rate of embryo development to hatched blastocyst after 96 hrs culture, HTF (87.5%) and Ham's F-10 (85%) were significantly higher than Medicult (70.5%). The beneficial effect of embryo development by cumulus cell coculture on two-cell mouse embryo among these three media was enhanced significantly in Medicult (control 88.5% versus coculture 98.5%) by 24 hrs, and was not enhanced statistical significantly but slightly elevated in Ham's F-10 (86.5% versus 95.5%) and HTF (91.3% versus 96.9%) by 48 hrs, but rates of embryo development were similar between control and coculture group in all three media by 96 hrs. Significant differences were not shown in three media, but HTF showed generally high tendency of the enhancing effect of embryo development and the beneficial effect of embryo development by coculture. Conclusions: As a result of culturing two-cell embryos in three media for 96 hrs, generally HTF and Ham's F-10 showed higher rate of embryo development than Medicult. As for the beneficial effect of coculture, Medicult only showed early transient significant improvement of embryo development. Considering that coculture effect of good quality media may be not so great, Ham's F-10 and HTF are more stable media than Medicult. Accordingly, HTF may be considered to be a medium to replace with Ham's F-10, however, the present study suggest that Medicult or HTF is not able to replace with Ham's F-10 in ART.
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