KCI등재
Transcriptional Regulation of Human GD3 Synthase (hST8Sia Ⅰ) by Fenretinide in Human Neuroblastoma SH-SY-5Y Cells
저자
Nam-Young Kang(강남영) ; Haw-Young Kwon(권화영) ; Young-Choon Lee(이영춘)
발행기관
학술지명
권호사항
발행연도
2010
작성언어
English
주제어
등재정보
KCI등재
자료형태
학술저널
발행기관 URL
수록면
1332-1338(7쪽)
제공처
사람 신경모세포종 세포주 SH-SY5Y에서 Fenretinide (FenR)에 의한 GD3합성효소(hST8Sia Ⅰ)의 발현증가기작을 규명하게 위하여 hST8Sia Ⅰ의 프로모터 활성을 조사해 본 결과 -1146에서 -646영역에서 FenR에 의한 활성증가를 나타내었다. 또한 부위특이적 변이의 분석은 -731에서 -722영역에 위치한 전사인자 NF-kB 결합부위가 hST8Sia Ⅰ의 FenR에 의한 활성증가에 중요하게 관여하고 있음을 나타내었다. FenR에 의한 hST8Sia Ⅰ 유전자의 발현유도에 포함된 신호전달기작을 전사인자 단백질의 항체를 이용하여 조사해 본 결과 FenR처리에 의해 세포질에서는 인산화된 AKT단백질 수준의 증가가 관찰되었고 핵내에서는 NF-kB의 p65단백질의 증가가 관찰되었다. 이러한 결과들은 FenR에 의한 hST8Sia I 유전자의 발현증가는 AKT신호전달경로에 의해 활성화된 NF-kB의 핵내로 이동하여 hST8Sia Ⅰ 유전자의 프로모터에 결합함으로서 전사가 촉진되어 일어난다는 것을 나타낸다.
더보기To elucidate the mechanism underlying the regulation of hST8Sia Ⅰ gene expression in FenR-induced SH-SY5Y cells, we characterized the promoter region of the hST8Sia I gene. Functional analysis of the 5’-flanking region of the hST8Sia Ⅰ gene showed that the -1146 to -646 region functions as the FenR-inducible promoter of hST8Sia Ⅰ in SH-SY5Y cells. Site-directed mutagenesis indicated that the NF-&B binding site at -731 to -722 was crucial for the FenR-induced expression of hST8Sia I in SH-SY5Y cells. To investigate which signal transduction pathway was involved in FenR-stimulated induction of hST8Sia Ⅰ in SH-SY5Y cells, we performed Western blot analysis using phospho-specific antibodies in order to measure their degree of regulatory phosphorylation. Phosphorylations of AKT and RelA (p65) subunit of NF-κB were significantly elevated in cytosolic and nuclear fractions of FenR-stimulated SH-SY5Y cells, respectively, than in control or DMSO-treated SH-SY5Y cells. These results suggest that FenR induce transcriptional up-regulation of hST8Sia I gene expression through translocation of RelA (p65) subunit of NF-κB to nucleus by AKT signal pathway in SH-SY5Y cells.
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