간질(Fasciola hepatica)성층의 Superoxide Dismutase정제와 부분 특성 : Purification and Partial Characterization of Superoxide Dismutase from Fasciola hepatica Adult Worms
저자
발행기관
중앙대학교 기초과학연구소(Institute For Basic Science Chung-Ang University)
학술지명
권호사항
발행연도
1991
작성언어
Korean
주제어
KDC
405.000
자료형태
학술저널
수록면
119-130(12쪽)
제공처
소장기관
간질(F. hepatica)성충에서 superoxide dismutase(SOD)를 ammonium sulfate 침전, DEAE-Trisacryl Mcolumn chromatography와 UItrogel AcA 54 column chromatography를 실시하여 순수 정제하고, 이들 효소의 활성도를 Noritaka et al.(l982)의 방법으로 활성도를 측정하였다. 그리고 이들 효소의 특성을 관찰하여 다음과 같은 결과들을 얻었다.
1. 간질(F hepatica)의 세포질에는 구리와 아연을 함유한 superoxide dismutase가 존재하며, 이들의 비활성도는 3.6mg 이었다.
2. 순수 정제된 superoxide dismutase의 비활성도는 101.9mg 이었으며, 분자량은 Ultrogel AcA 54 gel filtrations으로 측정한 결과 34Kda. 이었고, SDS-PAGE에 의한 subunit의 분자량은 17Kda.으로서 dimer로 구성된 효소이었다.
3. 순수 정제된 효소는 3mM cyanide 농도에서 효소의 활성이 100%억제되었고, 20mM azide 농도에서는 23%억제되었다.
4.정제된 효소는 완충용액의 pH가 10.0에서 효소활성이 4.7배 증가하였다.
The major superoxide dismutase of the Fasciola hepatica adult worms has been purified to homogeneity. The purification procedures included ammonium sulfate precipitation, DEAE-Trisacryl M column chromatography and AcA 54 gel filtration column chromatography. The activity of superoxide dismutase was measured by the method of Noritada et al.(1982).
The superoxide dismutase with native molecular weight of approximately 34Kda. was purified from crude extract using AcA 54 gel filtration column chromatography. By SDS-polyacrylamide gel electrophoresis, the molecular weight of enzyme was estimated to be 17Kda. And so, it was composed of two subunits of equal size, which were not covalently joined.
The activity of superoxide dismutase was inhibited 49.6% and 100% at 0.5mM and 3.0mM cyanide, respectively. But 10mM and 20mM azide caused 24.7% and 27% inhibition.
The activity of this enzyme was appeared 4.7 times more active when the buffer pH raised to 10.0.
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