KCI등재후보
과립구-단구 집락촉진인자가 급성백혈병 골수세포 장기배양에 미치는 영향 - 백혈병세포 생체외 골수정화법에의 적용가능성 검토 (1) - = The Effects of GM-CSF on the Long-Term Bone Marrow Cultures in Acute Leukemia - Exploration of Potential of LTBMC as a Means for in vitro Purging of Leukemic Cells (1) -
저자
민유홍 ( Min Yu Hong ) ; 고윤웅 ( Go Yun Ung ) ; 이선주 ( Lee Seon Ju ) ; 한지숙 ( Han Ji Sug )
발행기관
학술지명
권호사항
발행연도
1993
작성언어
-주제어
KDC
500
등재정보
KCI등재후보
자료형태
학술저널
발행기관 URL
수록면
327-346(20쪽)
제공처
연구배경 : 급성백혈병골수세포 장기배양시 백혈병전구세포의 증식을 소실되고, 정상조혈기능은 회복되는 백혈병세포 조혈상의 변화가 관찰될 수 있다. 실제로 일부 급성 백혈병환자의 골수를 장기배양한 후, 배양된 세포로 자가골수이식을 시행하여 골수생착 및 재발없이 경과 관찰중에 있음을 보고한 예가 있다. 그러나 장기골수 배양에 의한 자가골수이식술이 보다 효과적이 되기 위해서는 백혈병세포 정화효과 및 정상 조혈기전의 회복이 보다 증가되는 등 장기골수배양법의 개선이 필요하다. 본 연구에서는 자가골수이식을 위한 장기골수배양 골수정화 효과를 증가시키고 배양세포수를 증가시키는 방법의 일환으로 급성백혈병 골수세포를 유전자재조합 과립구-단구 집락촉진인자(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor; rhGM-CSF)로 24시간 단기배양후 장기배양하여, 배양기내 백혈병세포 감소 및 과립구-단구 조혈기능 변화를 검토하였다.
방법 : 급성백혈병환자 22예의 골수단핵세포를 rhGM-CSF (100ng/ml)로 24시간 단기배양 후 장기골수배양을 시행하였다. RHGM-CSF로 자극하지 않은 동일한 수의 백혈병세포는 대조군으로 하였으며, 배양전기간에 걸쳐 정상골수세포 장기배양상과 비교하였다. 장기골수배양은 25㎠ 배양기내 2~3×10^7개의 세포를 10ml 배양액에 부유시켰으며, 배양액은 12.5% fetal bovine serum, 12.5% horse serum이 포함된 배양액을 사용하였다. 매주 배양상을 역위현미경으로 관찰 후 배양액의 반을 교환하였으며, 추출한 배양액내 배부착세포는 세포수 측정, 형태학적 관찰 및 조혈전구세포배양을 시행하였다. 배양종료시에는 부착세포도 역시 같은 방법으로 실험하였다.
결과 :
1) 배양 1주째 GM-CSF 자극군에서 유의한 비부착세포의 증가가 관찰되었으며 이러한 증가는 분화성숙된 대상 및 분절과립구의 증가에 기인하였다. 백혈병아세포의 차이는 없었다. 배양 2주 이후 부착세포층의 형성 및 융합이 완료된 후에는 비부착세포수의 차이는 소실되었다.
2) GM-CSF 자극군에서 대상 및 분절과립구가 정상골수세포 장기배양시의 수준으로 증가하였던 경우는 GM-CSF 자극군에서 배양 1주째 8예(36%), 배양 2주째 13예(59%)로 대조군의 각각 4예(19%), 8예(36%)에 비해 많은 경향을 보였다. 과립구 및 골수아구가 정상화되는 경우는 배양 2주째가 가장 많았다.
3) 장기골수배양 조혈전구세포배양시 배양 1주째 정상세포집락을 보인 자극군 6예의 골수구-단구계 세포집락은 배양기당 평균 5,275±1,156로 대조군의 3,039±1,024에 비해 유의하게 많았다. 백혈병세포집락이 관찰되었던 4예의 평균 세포집락은 GM-CSF 자극군에서 240±196으로 대조군의 497±400에 비해 통계적 의의는 없었으나 감소되는 경향을 보였다. 배양 2주 이후의 이러한 차이는 관찰되지 않았다.
4) 배양 4주째 부착세포수 및 부착세포 조혈전구세포 배양 결과는 양군간의 유의한 차이를 보이지 않았다.
결론 : 급성백혈병 골수세포의 장기배양전 GM-CSF의 단기자극은 부착세포층이 완전히 형성되어 조혈조절작용을 하기 전인 배양 1주째 일부 예에서 자극된 골수계 조혈전구 세포의 장기배양내 증식 및 분화를 유도하여 비부착세포층내 분화성숙된 과립구 및 정상조혈전구세포를 증가시키며, 백혈병전구세포의 감소를 유도할 수 있는 가능성을 제시하였다. 그러나 배양기내 조혈조절작용에 의해 배양 2주 이후 초기 자극효과가 상쇄되었으며 본 실험 결과상 배양 2주째가 세포채집 시기로 적당한 바, 골수정화 효과를 지속적으로 증가시키기 위해서는 배양기내 간질세포 및 간질세포와 연관된 원시조혈모세포 수준에까지 작용할 수 있는 다양한 조혈촉진인자의 병용이 검토되어야 하겠다.
Background : Significant changes in leukemic cell behaviour have been reported to occur during long-term cultures of bone marrow from patients with AML. Recent reports of intensive therapy and hematopoietic rescue with autologous marrow cells grown in the long-term bone marrow culture (LTBMC) system have aroused much attention. But its effectiveness ans a means to purging leukemic cells and expansion of regenerating normal hemopoietic series should be increased for better autotransplant outcomes. Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF) is crucial in the regulation of proliferation and maturation of normal hematopoietic progenitor cells. It also exerts profound stimulative effects on leukemic cells, and renders them more susceptible to purging agents. To evaluate the effects of GM-CSF on the LTBMC-mediated myelopoietic recoveries and purging of leukemic cells, we studied the effects of GM-CSF priming on long-term cultures of acute leukemic bone marrow cells. Methods : The mononuclear bone marrow cells of 22 patients with acute leukemia were incubated with 100ng/ml GM-CSF for 24 hours. After preincubation, the LTBMCs were started in 25 ㎠-culture flask in 10 ml culture medium supplemented with 12.5% fetal bovine serum and 12.5% horse serum at 37℃. Over a period of 4 weeks, the LTBMCs were demipopulated and replaced by fresh medium weekly. Adherent layers were examined in situ by inverted microscopy of flask bases during the course of the study. Nonadherent cells recovered after feeding were counted, and plated in clonogenic assays and differentail morphologic counts were performed on cytospin preparation. Adherent layer cells were obtained by detaching at the termination of cultures by incubation with collagenase. Results : We found GM-CSF predomination influenced initial increase in (a) the number of nonadherent cells, (b) the number of terminally differentiated granulocytes (band and segmented neutrophils), and (c) the number of nonadherent granulocyte-macrophage colony-forming units (CFU-GM) consisted of myeloid cells morphologically identical to normal control cultures considerably (p<0.05) in LTBMC before the establishment of a confluent adherent layer. And GM-CSF priming tended to decrease the number of nonadherent leukemic colony-forming units in 1-week-old LTBMC, which is not statistically significant. These effects were lost after 2 weeks of LTBMC. Conclusion : GM-CSF priming of leukemic cells prior to LTBMC may be more effective for purging leukemic cells and expanding myeloid recoveries than without GM-CSF, but its effects were restricted before the establishment of confluent adherent layers. Its transient effects suggest that GM-CSF may not be active on primitive hemopoietic stem cells responsible for LTBMC propagation. Alternatively, stromal cells may exert tight regulatory control over progenitor cells. Further analysis will be required to enhance recovery of normal myelopoiesis and to decrease survival of leukemic progenitor cells more effectively on the basis of combined use with different hemopoietic growth factors or with other various cytokines.
더보기서지정보 내보내기(Export)
닫기소장기관 정보
닫기권호소장정보
닫기오류접수
닫기오류 접수 확인
닫기음성서비스 신청
닫기음성서비스 신청 확인
닫기이용약관
닫기학술연구정보서비스 이용약관 (2017년 1월 1일 ~ 현재 적용)
학술연구정보서비스(이하 RISS)는 정보주체의 자유와 권리 보호를 위해 「개인정보 보호법」 및 관계 법령이 정한 바를 준수하여, 적법하게 개인정보를 처리하고 안전하게 관리하고 있습니다. 이에 「개인정보 보호법」 제30조에 따라 정보주체에게 개인정보 처리에 관한 절차 및 기준을 안내하고, 이와 관련한 고충을 신속하고 원활하게 처리할 수 있도록 하기 위하여 다음과 같이 개인정보 처리방침을 수립·공개합니다.
주요 개인정보 처리 표시(라벨링)
목 차
3년
또는 회원탈퇴시까지5년
(「전자상거래 등에서의 소비자보호에 관한3년
(「전자상거래 등에서의 소비자보호에 관한2년
이상(개인정보보호위원회 : 개인정보의 안전성 확보조치 기준)개인정보파일의 명칭 | 운영근거 / 처리목적 | 개인정보파일에 기록되는 개인정보의 항목 | 보유기간 | |
---|---|---|---|---|
학술연구정보서비스 이용자 가입정보 파일 | 한국교육학술정보원법 | 필수 | ID, 비밀번호, 성명, 생년월일, 신분(직업구분), 이메일, 소속분야, 웹진메일 수신동의 여부 | 3년 또는 탈퇴시 |
선택 | 소속기관명, 소속도서관명, 학과/부서명, 학번/직원번호, 휴대전화, 주소 |
구분 | 담당자 | 연락처 |
---|---|---|
KERIS 개인정보 보호책임자 | 정보보호본부 김태우 | - 이메일 : lsy@keris.or.kr - 전화번호 : 053-714-0439 - 팩스번호 : 053-714-0195 |
KERIS 개인정보 보호담당자 | 개인정보보호부 이상엽 | |
RISS 개인정보 보호책임자 | 대학학술본부 장금연 | - 이메일 : giltizen@keris.or.kr - 전화번호 : 053-714-0149 - 팩스번호 : 053-714-0194 |
RISS 개인정보 보호담당자 | 학술진흥부 길원진 |
자동로그아웃 안내
닫기인증오류 안내
닫기귀하께서는 휴면계정 전환 후 1년동안 회원정보 수집 및 이용에 대한
재동의를 하지 않으신 관계로 개인정보가 삭제되었습니다.
(참조 : RISS 이용약관 및 개인정보처리방침)
신규회원으로 가입하여 이용 부탁 드리며, 추가 문의는 고객센터로 연락 바랍니다.
- 기존 아이디 재사용 불가
휴면계정 안내
RISS는 [표준개인정보 보호지침]에 따라 2년을 주기로 개인정보 수집·이용에 관하여 (재)동의를 받고 있으며, (재)동의를 하지 않을 경우, 휴면계정으로 전환됩니다.
(※ 휴면계정은 원문이용 및 복사/대출 서비스를 이용할 수 없습니다.)
휴면계정으로 전환된 후 1년간 회원정보 수집·이용에 대한 재동의를 하지 않을 경우, RISS에서 자동탈퇴 및 개인정보가 삭제처리 됩니다.
고객센터 1599-3122
ARS번호+1번(회원가입 및 정보수정)