고순도 알지네이트 스펀지를 이용한 조직공학적 섬유륜 세포의 재생
저자
발행사항
전주: 전북대학교 일반대학원, 2012
학위논문사항
학위논문(석사)-- 전북대학교 일반대학원 대학원: BIN융합공학과 2012. 2
발행연도
2012
작성언어
한국어
발행국(도시)
전북특별자치도
기타서명
Effect of Purified Alginate Sponge on the Intervertebral Disc Regeneration of Annulus Fibrosus Cells
형태사항
xi, 60 p.: 삽화; 26 cm
일반주기명
전북대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다
지도교수:강길선
참고문헌 : p.29-36
소장기관
알지네이트는 천연고분자로써 생체 재료 응용에 많이 이용되고 있다. 그러나 체내에 이식할 경우, 면역 거부 반응이 발생한다. 이 문제점을 극복하기 위해서 modifed Korbutt’s 방법을 이용해서 알지네이트 정제를 하고, 고순도 알지네이트를 제조하였다. 고순도 알지네이트를 이용하여 알지네이트 필름을 제조한 후 RAW 264.7 macrophage cells을 이용하여 본연의 알지네이트 필름과 고순도 알지네이트 필름에 세포를 파종하였다. 알지네이트 필름에 의한 염증 발현정도를 확인하기 위하여 RT-PCR을 수행하였으며 필름과 조직 간의 상호작용을 통한 염증세포의 침윤과 대식세포 발생 정도를 확인하기위해 H&E와 ED-1 염색을 수행하였다. 실험결과 정제과정을 통해 불순물이 제거됨으로써 고순도 알지네이트 필름에서 염증반응이 완화된 것으로 미루어 보아 고순도 알지네이트가 유용한 생체재료가 될 것으로 사료된다. 고순도 알지네이트와 본연의 알지네이트 스펀지에 NIH/3T3 세포를 파종하여서 세포 생존율을 분석하기 위한 MTT와 세포 부착율을 분석하기 위한 SEM을 통해서 관찰하였다. 그 분석 결과, MTT와 SEM을 통해서 고순도 알지네이트 스펀지가 세포의 성장에 더 좋은 환경을 제공한다는 것을 보였다. 그래서 추간판 디스크 재생을 위한 섬유륜 세포를 응용해서 고순도 알지네이트와 본연의 알지네이트 스펀지에 파종하였다. MTT 분석을 통하여 세포 생존율을 확인하고 섬유륜세포에서 발생하는 특이적 유전자 발현을 확인하기 위하여 PCR을 수행하였다. 또한 알지네이트 스펀지에 파종된 섬유륜 세포의 in vivo 환경에서의 세포 거동을 관찰하기 위하여 누드마우스 피하에 이식한 뒤 4 주 후 적출하여 조직학적 염색을 실시하였다. 실험결과 in vitro, in vivo 모두에서 본연의 알지네이트에서 보다 고순도 알지네이트에서 섬유륜세포의 친화도나 표현형유지에 긍정적인 영향을 끼치는 것을 확인할 수 있었다. 이러한 결과로 미루어 보아 고순도 알지네이트가 추간판 디스크재생에 있어서 유용한 생체재료가 될 것으로 사료된다.
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