인삼養營湯의 산화적 stress에 대한 뇌세포 보호효과 = Neuroprotective effect of insamyangyung-tang
저자
발행사항
서울 : 경희대학교 한의과대학원, 2009
학위논문사항
학위논문(박사)-- 경희대학교 대학원 : 한의학과 2009. 2
발행연도
2009
작성언어
한국어
DDC
616-H 판사항(22)
발행국(도시)
서울
형태사항
35 p. : 삽도 ; 26 cm
일반주기명
경희대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.
지도교수: 이경섭
참고문헌 : p. 29-33
소장기관
人蔘養營湯의 항산화 효과 및 뇌세포 보호효과를 알아보기 위해 人蔘養營湯 추출물이 human neuroblastoma cell과 태아중뇌 도파민세포에서 6-OHDA로 유도된 세포독성에 대한 보호효과를 관찰하여 다음과 같은 결론를 얻었다.
1. DPPH free radical inhibition activity와 ABTS radical cation decolorization activity를 측정한 결과, 人蔘養營湯 추출물의 농도 의존적 소거능을 확인하였고, IC50은 각각 571.6, 202.3㎍/㎖ 였다. 총 폴리페놀 함량은 1.05% 였다.
2. SH-SY5Y세포에서 6-OHDA 처리 전 人蔘養營湯 추출물 투여 시에는 10㎍/㎖ 투여군에서, 동시 처리 시에는 100㎍/㎖ 투여군에서, 6-OHDA 처리 후 人蔘養營湯 추출물 투여 시에는 1㎍/㎖ 투여군을 제외한 모든 투여군에서 통계적으로 유의한 세포보호 효과가 관찰되었다.
3. 모든 농도의 人蔘養營湯 추출물 처리군에서 6-OHDA 처리 후 30, 60 및 120분 반응시간에 따라 ROS의 생성은 대조군에 비해 통계적으로 유의하게 억제되었다.
4. 태아중뇌세포에서 6-OHDA에 의해 감소된 도파민 세포를 0.2㎍/㎖ 人蔘養營湯 추출물이 6-OHDA 단독 투여군에 비하여 통계적으로 유의하게 도파민세포를 증가시켰다
5. 태아중뇌세포에서 6-OHDA에 의해 증가된 NO와 TNF-α를 0.2㎍/㎖의 인삼양영탕 추출물이 6-OHDA 단독 투여군에 비하여 통계적으로 유의하게 감소시켰다.
Objectives: Oxidative stress was thought to play a critical role in neurodegenerative disease. Many in vivo and in vitro reports explained the possible pathway of human aging. But in therapeutic aspects, there was no clear answers to prevent aging associated with neural diseases. In this study, we investigated the antioxidant and neuroprotective effects of the Insamyangyung-tang (IYT).
Methods: To estimate the antioxidant effects, we carried out 1.1-diphenyl-2- picrylhydrazyl (DPPH) free radical scavenging assay, 2,2' -azinobis-(3-ethylbenzothiazoline-6- sulfonic acid (ABTS) radical cation decolorization assay, and measurement of total polyphenolic content. To evaluate neuroprotective effect of IYT in vitro. We performed thiazolyl blue tetrazolium bromide (MTT) assay, reactive oxygen species (ROS) creation in SH-SY5Y. Tyrosine hydroxylase (TH) immunocytochemistry, nitric oxide (NO) assay, and TNF-α assay in primary rat mesencephalic dopaminergic neurons.
Results: The IC50 values were 571.6㎍/㎖ and 202.3㎍/㎖ in DPPH and ABTS assay respectively. Total polyphenolic content was 1.05%. In SH-SY5Y culture, IYT significantly increased the decreased cell viability by 6-OHDA at the concentrations of 10 ㎍/㎖ in pre-treatment group, 10-100㎍/㎖ in post-treatment group, and 100㎍/㎖ in co-treatment group. The production of ROS induced by 6-OHDA was significantly inhibited in IYT treated group. In mesencephalic dopaminergic cell culture, the IYT group reduced the dopaminergic cell loss against 6-OHDA toxicity and the production of No and TNF-α at the concentration of 0.2㎍/㎖.
Conclusion: These results showed that IYT has antioxidant and neuroprotectctive effects in the dopaminergic cells through decreasing the production of ROS, NO and TNF-α which can cause many neurodegenerative changes in brain cell.
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